Cell-Zero®悬浮细胞固定免疫荧光专用玻片

货号：C230125/ C230150/C230100

规格：25/50片/100片

外观：圆形透明

直径：12mm

厚度：0.17mm

运输：常温运输

储存：短期常温；长期4°C     

产品背景 

细胞免疫荧光(IF)主要是用于蛋白定位的研究、信号转导和相互作用研究。按细胞培养的类型，可分为贴壁细胞和悬浮细胞（淋巴细胞、白细胞）。贴壁细胞是有天然的贴壁属性，而悬浮细胞是没有此属性，故而在培养基中呈悬浮状态。

通常免疫荧光是需要将细胞固定在玻片上的，而悬浮细胞的固定会取决于每个人的操作手法，而即使同一人操作也都无法保证细胞玻片上的固定情况，针对长期以来“掉片”的痛点，Biotarget®的产品悬浮细胞固定免疫荧光专用玻片能有效的解决该痛点（像贴壁细胞一样处理非贴壁细胞）。

悬浮细胞固定免疫荧光专用玻片表面均匀分布TargoNano®可促黏附固定的化学材料，以及维持细胞存活的生物材料。可使悬浮细胞像贴壁细胞一样贴壁生长，操作简单，无需离心即可将悬浮细胞固定到玻片上。仅需将培养好或者刺激好的细胞滴加到玻片上，等待约30分钟，不要超过1小时，使用1XPBS PH7.2洗涤未结合的细胞，既可以继续免疫染色，也可以再刺激处理细胞，继续短时培养。

操作步骤

1. 用PBS洗涤细胞，并在PBS中重悬，调整到浓度为2~5×10⁶/mL

2. 将玻片放入12孔板里（玻片直径12mm），便于后续实验操作。将细胞直接滴加到玻片上（每玻片20-30万细胞），体积控制到滴加60-150ul，2~3×10⁵个细胞/玻片

3. 室温静置让细胞沉降并粘附30分钟。对于某些不易黏附固定的细胞类型，可考虑通过延长孵育时间来增强，但不要超过1小时

4. 用2mL PBS轻轻洗涤以去除未结合的细胞（不要将PBS直接滴加到载玻片上以避免对细胞的冲洗，将PBS滴加到板孔的边缘，让其自由流到玻片，然后轻轻摇晃3-5分钟）

5. 在显微镜下检查细胞附着，如果固定的细胞偏少，可以再次滴加细胞，重复前述操作。如果需要进一步培养，请添加1毫升培养基，否则进行固定、破膜和免疫染色

验证细胞

• Jurkat：人急性 T 淋巴细胞白血病细胞

• K562：人慢性髓系白血病细胞

• U937：人单核细胞白血病细胞

• Daudi：人伯基特淋巴瘤细胞

• PC12：大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞

• Raw264.7：小鼠单核巨噬细胞白血病细胞

• MOLT4：人急性淋巴母细胞白血病细胞

• PBL culture：外周血淋巴细胞培养物

• THP1：人单核细胞白血病细胞

• Human PBMC：人外周血单个核细胞（PBMC = Peripheral Blood Mononuclear Cell）

• Mouse splenocytes：小鼠脾细胞

• Mouse thymocytes：小鼠胸腺细胞

• Rat splenocytes：大鼠脾细胞

• Rat thymocytes：大鼠胸腺细胞

• HL-60：人急性早幼粒细胞白血病细胞

• T-ALL：急性 T 淋巴细胞白血病

• NCI-H69：人小细胞肺癌细胞

实例图片：