动物组织冻存液

实验室取样

1.取组织样本后，立即将其放入适量的预冷PBS缓冲液中。用塑料镊子轻轻夹取组织， 缓慢搅动，轻柔地冲洗组织表面，着重去除血液、粘液及其他各类污染物。反复冲洗直至组织表面彻底洁净，无明显可见的杂质残

2.根据样本大小和实验需要，分割和分装组织。

3.将组织切碎成0.1cm*0.1cm*0.1cm大小。

4.根据组织重量加入比例的组织冻存液，100mg组织样本对应1mL冻存液。

5.确保组织冻存液填满冻存管，颠倒混匀数次，使组织完全浸没其中。可考虑使用封口膜紧密缠绕冻存管管口，保证密封无泄漏。

6.将组织冻存管放置于程序性降温盒内（1℃/min），逐步降温（即慢冻），再放入-80℃冰箱。

备注：

• 需将组织切割为≤1mm³小块，减少冻存液渗透阻力。

• 来自消化系统或泌尿生殖系统（如肠、胃等）的肿瘤组织在离体后可先用无菌 PBS 溶液或生理盐水漂洗，以去除血迹和污物。

• 冻存液和样本体积对应，确保充分渗透，每100mg组织不低于1mL冻存液。

• 冻存组织复苏时，快速置于37℃水浴并摇晃（即快融）。

• 完全融化混匀后，逐滴加到预热37℃的培养基中，4℃离心收集组织用于后续实验。