组织解离、原代细胞分离与细胞收集，是胶原酶和胰酶在组织酶解及细胞生物学研究中的核心用途。尽管多年来酶制剂已在上述实验中得到广泛应用，发表文献众多。但具体到研究者个人，尤其新手，对其在组织解离与细胞收集过程中的作用机制仍缺乏充分认知。因此，研究人员选用实验方法时往往较为随意，更多依靠过往实操经验，而非理解该方法生效的底层原理，也不清楚通过哪些调整能够进一步优化实验结果。

细胞分离实验的核心目标是尽可能提升解离细胞的收获量，同时保证细胞功能活性完好。诸多实验参数都会影响最终分离效果，主要包含但不限于以下因素：

• 组织类型

• 组织来源物种

• 实验动物日龄

• 基因修饰类型（基因敲除等）

• 所用组织解离缓冲液

• 选用的酶种类

• 粗提酶制剂中的杂质组分

• 酶的工作浓度

• 孵育温度

• 酶解孵育时长

前四项参数通常由实验材料决定，无法人为更改。若想要获得理想的细胞分离效果，其余可变实验条件最好通过预实验摸索确定。

科研人员查阅文献，试图寻找组织解离最优酶制剂与配套实验条件时，常常会发现各类文献的数据相互矛盾。这类数据差异的成因主要有两点：

1.细胞外基质结构复杂、动态变化；

2.长久以来细胞分离实验普遍使用组分粗糙、成分不明确的粗提酶制剂。

细胞外基质由大量蛋白、糖蛋白、脂质、糖脂构成，各类组分的含量会随物种、组织、个体发育阶段产生明显差异。实验室常用的粗提酶制剂，如胶原酶等，均含有多种浓度不一的蛋白酶，同时混杂各类多糖酶、核酸酶与脂肪酶。样本和酶的这些不确定性因素，导致实验结果的不稳定性。

基于梳理总结了各类酶完成常规组织解离、细胞收集操作的作用机理，Biotarget提供标准化实验室操作流程，赋能一套逻辑清晰的实验方案搭建思路，用于建立适配自身实验的细胞分离流程，并罗列大量针对不同组织的参考文献。尊重理论知识，积累实践经验，致力于Cell-Out®组织酶解，细胞分离和保存的产品和服务。在细胞得率和细胞活性间取最大公约数，高质量的单细胞悬液用于后续培养，分选或者单细胞测序。